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酶標儀使用注意
發(fā)布日期： 2022/10/13 17:21:29

酶標儀（Microplate Reader）是對酶聯(lián)免疫檢測（EIA）實驗結(jié)果進行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標本中待測抗體或抗原的濃度。酶標儀實際上就是一臺變相的專用光電比色計或分光光度計，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計基本相同。
酶標儀的工作原理
    使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達到很高的敏感度。
檢測單位：
光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
檢測單位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，OD=10g（1/trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系：
E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表示被吸收的光密度，Ⅰ0為在檢測物之前的光強度，Ⅰ為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算：
E=OD=C×D×E
其中：C為檢測物的濃度；D為檢測物的厚度；E為摩爾因子。
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
酶標儀維護保養(yǎng)注意事項：
    1、儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓，低于40分貝的環(huán)境下；
    2、應(yīng)避免陽光直射以防止設(shè)備老化；
    3、操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15％－85％之間；
    4、運行中操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定；
    5、操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵；

    6、保持干燥、干凈、水平的工作臺面，足夠大的操作空間；

    7、使用加液器加液，加液頭不能混用；

    8、盡量配套使用洗板機洗板，能有效避免交叉污染；
    9、在測量過程中，請勿碰酶標板，以防酶標板傳送時擠傷操作人員的手；
    10、請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手；
    11、如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學危害，請嚴格按照試劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。
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